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36棋牌官网:益生菌对哺乳仔猪生产性能及胃肠道生理状态

http://www.bifatt.com.cn 猪价格网 2020-05-22 11:07 左左 网友评论 |

36棋牌官网下载 www.bifatt.com.cn       抗生素在畜牧生产中的滥用,导致抗药、耐药、残留及超级病菌的产生,已引起了世界各国的普遍关注。许多国家已经禁止抗生素作为饲料添加剂,寻找一种绿色环保型抗生素替代品———微生态制剂也就应运而生。益生菌是一种微生物补充剂,通过改善宿主肠道微生物菌群平衡,对宿主产生有益的效果。益生菌之所以对人和动物体的健康有益,与其生物学特性紧密相关,可帮助宿主提高营养物质的消化利用率。益生菌能黏附在人和动物肠道黏膜上生长繁殖,是其产生有益作用的前提之一。当益生菌在肠道内定植并大量繁殖后,可竞争性地与病原微生物争夺营养物质,并产生相应的细菌素等生物活性物质,来抑制病原微生物的生长和繁殖,从而提高机体的健康水平。譬如乳酸菌产生的乳酸等有机酸能降低肠道pH值,在动物处于应激状态时亦能维持肠道内环境的稳定,防止病原菌因势而起;还有一些益生菌能产生抗菌肽,从而抑制有害菌的生长。益生菌能刺激肠道黏膜,产生黏膜免疫应答,增强体液和细胞免疫,促进抗炎因子的产生,减少炎症反应。研究表明乳酸菌能激活巨噬细胞,增强对致病菌的杀灭作用,提高黏膜免疫相关因子的表达水平,从而提高机体免疫力。

      仔猪由于胃肠道发育不健全,同时在其生长过程还伴随着断奶、饲料变化、转舍等应激因素,将会导致仔猪肠道菌群紊乱,易引发疾病,致使仔猪成活率低。目前,益生菌广泛应用于我国养猪业生产中。研究发现,在哺乳仔猪的教槽料中添加复合益生菌,可提高仔猪日增重,降低仔猪腹泻率和死亡率,并降低仔猪生长前期粪便中大肠杆菌数量及提高乳酸菌数量,对改善肠道健康具有重要意义。另据报道,利用嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌灌服哺乳仔猪,发现益生菌能显著提高仔猪日增重、血清免疫球蛋白含量及肠道乳酸杆菌数量,降低仔猪腹泻率和粪便中大肠杆菌数量,并对小肠绒毛的发育有促进作用。由于不同的益生菌及其组合具有不同的益生功能,研究和开发新的复合益生菌对仔猪的健康生产具有重要意义。

      本研究根据益生菌对病原菌生长和繁殖的抑制作用,制成干酪乳杆菌和粪肠球菌的复合液体制剂,以哺乳仔猪为试验对象,探索益生菌对乳仔猪生长性能和健康状况的影响,为哺乳仔猪健康生长提供良好的理论和实践指导。

      1、材料与方法

      1.1 菌种选择

      试验选用干酪乳杆菌(Lactobacillus Casei)和粪肠球菌(Enterococcus faecalis)菌种均购自中国科学院微生物研究所,并由河南农业大学动物营养与生物技术研究室保存。根据本研究室前期的工作基础,确定干酪乳杆菌和粪肠球菌的比例为3∶1时,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生长的抑制能力最强,并以此配比进行下一步的哺乳仔猪试验。



      1.2 培养基及培养方法

      培养干酪乳杆菌和粪肠球菌的乳酸细菌培养基(MRS)组成:胰蛋白胨15g、酵母浸粉1g、葡萄糖20g、吐温-80 1mL、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸铵2g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g,用蒸馏水定容至1L,在MRS液态培养基中加入1.5%琼脂可制备MRS固态培养基,2种培养基在121℃、0.15MPa高压蒸汽灭菌20min备用。干酪乳杆菌和粪肠球菌37℃静置培养24h,测定培养液的活菌数,分装并于4℃保存备用,使用前调整2种菌活菌数为1×109 CFU/mL。粪便中乳酸菌数量的测定采用厌氧管滚管培养法,在37℃下静置培养48h。微生物数量的表示方法,以每1mL或1g样品中所含的菌落数(CFU)为标准,以自然对数值(Lg)表示。

      培养大肠杆菌的伊红美蓝鉴别培养基(EMB,北京奥博星)组成:称取EMB 42.5g,加入1L蒸馏水,在121℃、0.15MPa高压灭菌20min,制备含培养基的平皿备用。大肠杆菌37℃静置培养48h,其菌落呈现亮紫色。

      1.3 试验设计及动物的饲养管理

      试验选择品种相同(长白×大白×杜洛克三元杂交)、出生日期和体质量相近的仔猪15窝,每窝选择8头,共120头仔猪,分为4个处理组,每个处理组15个重复,每个重复2头仔猪(公母各半)。对照组,灌服生理盐水;试验Ⅰ组:灌服干酪乳杆菌培养液;试验Ⅱ组:灌服粪肠球菌培养液;试验Ⅲ组:灌服干酪乳杆菌和粪肠球菌混合培养液。

      试验从仔猪出生开始持续至21日龄断奶,并延续1周,试验期为28d。所选仔猪均在同一猪舍内,舍内清洁干燥、通风良好,舍内温度和相对湿度分别为(25±2)℃和65%~70%。仔猪保育箱内第1周和第2周温度分别为(33±2)℃和(30±2)℃,然后维持在(25±2)℃。试验期间饲养管理和免疫程序均按规?;沓⊥骋灰笾葱?。仔猪出生第1天灌服1mL益生菌制剂,以后每隔7d灌服1次,每次递增1mL至21日龄,对照组灌服生理盐水。仔猪7日龄后开始添加教槽料至28日龄,期间自由采食和饮水。

      1.4 生长性能的测定

      在仔猪出生后,称取每头仔猪的初始体质量;在21,28日龄时,分别称取每头仔猪的体质量,并计算仔猪的日增重。每天观察仔猪精神状态及腹泻情况(以粪样颜色及是否水样等为准),计算腹泻率及死亡率。腹泻率=仔猪腹泻头次/试验头数/试验天数×100%;死亡率=仔猪死亡头数/试验头数×100%。

      1.5 胃肠道消化酶活性和pH值的测定

      选择对照组和复合益生菌组21日龄仔猪各3头,心脏放血处死,采集消化道各段的内容物各5g,分别于4℃和-20℃保存,用于测定各肠道内容物中微生物数量和消化酶活性。蛋白酶的测定参照国家标准(1999)推荐的中性蛋白酶活的测定方法,即福林法。蛋白酶活性的定义为:在40℃条件下,每1min产生1μg酪氨酸定义为1个蛋白酶活力单位(U)。蛋白酶活(U/g)=测得的酪氨酸含量/反应时间×4×样品稀释倍数/样质量。淀粉酶活性采用DNS法,淀粉酶活性定义为每1min产生1mg葡萄糖所用酶量为1个酶活力单位(U)。淀粉酶活(U/g)=样品中还原糖含量×样品稀释液总体积×稀释倍数/样品质量/测定所用酶体积/5。另外,取适量胃肠道内容物于试管中,用pHS-2C酸度计测定样品pH值。

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